Barwienie metodą Ziehla-Neelsena
 Bakterie gruźlicy zabarwione metodą Ziehla-Neelsena | |
| Metoda | |
| Zastosowanie | uwidocznienie drobnoustrojów charakteryzujących się cechą kwasooporności |
|---|---|
| Użyte odczynniki | fuksyna karbolowa, roztwór alkoholu etylowego zakwaszonego kwasem solnym, błękit metylenowy |
| Metoda | Ziehl-Neelsena |
| Zabarwienie wybranych struktur | |
 | Ten artykuł od 2009-11 wymaga zweryfikowania podanych informacji. |
Barwienie metodą Ziehla-Neelsena – w bakteriologii rodzaj techniki diagnostycznej służącej do barwienia prątków (diagnostyka gruźlicy).
Wykonanie
- na utrwalony rozmaz bakterii na odtłuszczonym szkiełku podstawowym nanosimy barwnik podstawowy (stężona fuksyna karbolowa[1]) na 15 min. W trakcie barwienia podgrzewamy preparat palnikiem (do tzw. „trzech par”)
- zlewamy barwnik
- odbarwiamy preparat w 3% roztworze HCl w etanolu (kwaśny alkohol)
- spłukujemy wodą destylowaną
- nanosimy barwnik kontrastowy, np. błękit metylenowy na 10 min
- spłukujemy wodą destylowaną
- suszymy preparat na pasku bibuły i przeprowadzamy obserwacje w mikroskopie świetlnym pod powiększeniem 1000x z zastosowaniem imersji
Wynik
W wyniku barwienia bakterie kwasooporne (prątki) przybierają kolor czerwony pochodzący od fuksyny (nie odbarwiają się one bowiem w kwaśnym alkoholu). Natomiast, śluzy, komórki nabłonka oraz inne bakterie obecne w preparacie bezpośrednim, niekwasooporne, są wrażliwe na działanie kwaśnego alkoholu, odbarwiają się w nim z fuksyny i wybarwiają się na kolor niebieski od błękitu metylenowego.
Metodą tą można też identyfikować promieniowce.
Zobacz też
Przypisy
- ↑ Hans Günter Schlegel: Mikrobiologia ogólna. Warszawa: Wydawnictwo Naukowe PWN, 2003, s. 129. ISBN 83-01-13999-4.
Media użyte na tej stronie
Mycobacterium tuberculosis Ziehl-Neelsen stain 02.jpg
This photomicrograph reveals Mycobacterium tuberculosis bacteria using acid-fast Ziehl-Neelsen stain; Magnified 1000 X.
The acid-fast stains depend on the ability of mycobacteria to retain dye when treated with mineral acid or an acid-alcohol solution such as the Ziehl-Neelsen, or the Kinyoun stains that are carbolfuchsin methods specific for M. tuberculosis.
This photomicrograph reveals Mycobacterium tuberculosis bacteria using acid-fast Ziehl-Neelsen stain; Magnified 1000 X.
The acid-fast stains depend on the ability of mycobacteria to retain dye when treated with mineral acid or an acid-alcohol solution such as the Ziehl-Neelsen, or the Kinyoun stains that are carbolfuchsin methods specific for M. tuberculosis.